Congrès - Recherche d'activité

L’inflammation aiguë joue un rôle important pour la santé d’un individu. C’est un mécanisme naturel de protection du corps contre une agression externe (infection par des micro-organismes (bactéries, champignons, virus), brûlure, plaie) ou interne (cellules cancéreuses). Toutefois, l’inflammation chronique peut mener à des maladies dites inflammatoires, dont la maladie de Crohn et l’arthrite rhumatoïde. Avec le temps, l’inflammation chronique peut aussi provoquer des lésions à l’ADN et contribuer au développement d’un cancer. C’est le cas entre autres du cancer de la vessie, du sein et de la prostate. Le développement de nouvelles stratégies de traitement du cancer faisant intervenir un anti-inflammatoire attire l’intérêt des chercheurs. Nous avons identifié un dérivé de l’acide para-aminobenzoïque (1) pouvant réduire la taille d’une tumeur de la vessie de 90% en seulement 25 jours dans un modèle animal, et ce sans effets secondaires apparents. Dans le but de découvrir des produits encore plus puissants, une série d’hydrazones (2) ont été préparés en quatre étapes chimiques efficientes et testés pour leur pouvoir anti-inflammatoire sur des cellules cancéreuses murines de la vessie (MB49-I) et sur les macrophages murins (RAW-264.7). Cette communication portera sur la synthèse et l'activité biologique de ces nouveaux composés.

BRCA1 est un suppresseur de tumeur majeur dont les mutations augmentent les taux de cancers du sein et de l’ovaire. Malgré plusieurs investigations, peu est connu sur le mécanisme d’action de BRCA1 et cela met en évidence l’importance d’étudier ce dernier. BRCA1 participe à la réparation des bris double brins, cependant son mode d’action dans d’autres voies de réparation reste peu connu. Notre objectif consiste à investiguer la fonction de BRCA1 en présence de différents dommages à l’ADN. Diverses lignées cellulaires ont été traitées par des agents génotoxiques tels que l’irradiation gamma (induisant des bris double brins réparés entre autres par recombinaison homologue), les rayons ultraviolets (UV, induisant des dimères de pyrimidines réparés par le système d’excision de nucléotides) et le methylmethane sulfonate (MMS, induisant des alkylations de base réparées par le système d’excision de bases) dans le but d’étudier la stabilité et la localisation de BRCA1. Nous avons observé que contrairement au traitement par l’irradiation gamma, BRCA1 est dégradé par le protéasome après traitement par MMS ou UV.  Nous concluons que BRCA1 est dégradé spécifiquement durant la réparation des dommages causés par MMS ou UV pour éviter des compétitions entre les diverses voies de réparation de l’ADN. Notre étude a permis une connaissance plus approfondie sur BRCA1 et sera utile pour le développement d’une stratégie de traitement contre le cancer du sein.  

Le cancer touche 45% des Canadiens et son incidence augmente avec l'âge. Cette maladie implique une prolifération non contrôlée et des besoins métaboliques plus élevés chez les cellules cancéreuses. Le long ARN non codant Neat2 a été identifié comme un gène surexprimé dans certains cancers dont celui du foie. Il est connu que Neat2, clivé en 2 parties, est présent dans les tumeurs et favorise l'apparition de métastase. Nous croyons que Neat2 serait impliqué dans la prolifération cellulaire via un rôle dans le métabolisme énergétique cellulaire. Pour valider notre hypothèse, nous avons mesuré les niveaux de Neat2 dans des fibroblastes en prolifération, en arrêt de croissance par contact, et lors de l'induction de la différenciation. Nous avons noté que l’expression de Neat2 diminue lors de l’induction de la différenciation. Nous avons ensuite infecté des hépatocytes de souris avec différentes constructions de Neat2. En utilisant le marquage Ki67 et PCNA, nous observons une augmentation de prolifération attribuable à la séquence C-terminale du gène. Nous observons que la surexpression de cette même séquence stimule fortement la captation cellulaire de glucose. Ces résultats suggèrent que la surexpression de Neat2 favorise la prolifération cellulaire et un métabolisme énergétique accru. Ce long ARN non codant pourrait être utilisé comme marqueur potentiel entre autre pour un diagnostic précoce ou comme pronostic. Cette étude est financée par le CRSNG. 

Le transporteur microsomal de G-6-P est fortement exprimé dans les glioblastomes, des tumeurs cérébrales hautement agressives. La modulation de l’expression de G6PT affecte la survie des cellules cancéreuses. Le rôle de G6PT dans les processus d’adaptation métabolique liés à la cancérogénèse des glioblastomes et les facteurs intracellulaires responsables de sa régulation transcriptionnelle demeurent peu documentés. Nous émettons l’hypothèse que G6PT est un acteur central associé au développement tumoral et que toute intervention pharmacologique de son expression affectera la survie des cellules cancéreuses cérébrales. Lorsque les cellules U87 sont stimulées par le TNFα, le PMA ou la ConA, on observe l’augmentation de l’expression de biomarqueurs inflammatoires (COX-2) et invasifs (MT1-MMP) menant à la répression génique de G6PT et à la diminution de l’activité luciférase régulée par le promoteur de G6PT. Ces changements d’expression modulent également la survie des cellules U87. Des inhibiteurs pharmacologiques (CP, AKBA, LY, PP2) renversent l’expression génique de G6PT affectée par le TNFα, le PMA ou la ConA montrant un rôle des facteurs IKK, JAK3 et PI3K. Des mutants de délétions progressives du promoteur de G6PT ont permis d’identifier une séquence importante dans la régulation de sa transcription. En conclusion, nos résultats montrent qu’un ciblage pharmacologique de G6PT aurait un impact sur la cancérogénèse liée à l’adaptation métabolique des glioblastomes.

Lors de la formation d’une cassure double-brin de l'ADN (CDB), la poly (ADP-ribose) polymérase-1 (PARP-1) est une des premières protéines recrutées. Une fois activée par sa liaison aux extrémités libres de l’ADN, PARP-1 utilise le NAD⁺ pour générer un polymère de poly (ADP-ribose) (PAR). Celui-ci agit alors comme une “plateforme” de recrutement des facteurs de réparation de l'ADN.

Nous avons identifié la protéine NONO, une protéine connue pour lier l’ARN, comme une nouvelle protéine liant le PAR. Nous avons démontré que le domaine de liaison à l'ARN 1 (RRM1) de NONO est principalement responsable de la liaison au PAR, mettant ainsi en évidence une compétition entre l'ARN et PAR comme substrat de NONO.

Étonnamment, le recrutement de NONO au site de dommage de l'ADN in vivo dépend entièrement du PAR qui est généré par PARP-1 lors de son activation. Nous démontrons également que suivant son recrutement aux sites de dommages à l’ADN, NONO stimule le non homologous end joining (NHEJ) et réprime la recombinaison homologue (RH) in vivo. Nos résultats donc placent NONO après l'activation de PARP dans le processus de décision de la voie de réparation des CDBs. La compréhension du mécanisme d'action des protéines qui agissent dans la même voie que PARP-1 est essentiel pour comprendre l'effet des inhibiteurs de PARP, qui ont déjà atteint la phase III dans les essais cliniques, mais qui requièrent une caractérisation plus approfondie.

HER2 est un facteur pronostic et prédictif dans le cancer du sein. Avec l'introduction thérapeutique du trastuzumab, l’évaluation fiable du statut du récepteur est essentielle. L’analyse immunohistochimique (IHC) et l’hybridation fluorescente in situ (FISH) sont utilisées pour évaluer HER2. Les nouvelles lignes directrices de l’Association américaine d’oncologie clinique/Le collège des pathologistes américains (ASCO/CAP) recommandent d’évaluer HER2 par IHC ou FISH sur la biopsie et de répéter le test sur la pièce chirurgicale quand le résultat est équivoque. Nous voulons analyser si la biopsie fournie par le radiologiste (représentée par un bloc contenant du tissu tumoral choisi aléatoirement) donne des résultats fiables comme si on avait mesuré HER2 sur la zone tumorale ayant servi au diagnostic (représenté par le bloc utilisé pour le diagnostic). Dans une cohorte de 106 cas de cancer du sein diagnostiqués entre 2011 et 2012, nous avons examiné la concordance entre les résultats (IHC et FISH) obtenus avec le bloc utilisé pour le diagnostic et ceux obtenus avec le bloc choisi aléatoirement. La concordance générale, celle positive et celle négative étaient 93,6%, 92,8%, 93,9% à l’IHC et 98,0%, 97,2%, 98,5% au FISH. Les résultats obtenus au FISH, mais pas ceux observés à l’IHC, satisfont l’exigence de l’ASCO/CAP d’au moins 95% de concordance. La seule utilisation de l’IHC ne pourrait pas représenter une méthode fiable pour évaluer HER2 sur biopsie dans les carcinomes mammaires.

Les neutrophiles ont été impliqués dans la progression du cancer du poumon. L’induction des neutrophiles est contrôlée par le récepteur de chimiokine CXCR2 et le rythme circadien. Ces facteurs régulent le trafic et la formation de pièges extracellulaires de neutrophiles (NET) en fonction de l'heure de la journée. Cependant, on ne sait pas si CXCR2 peut être ciblé temporellement pour prévenir l'induction des neutrophiles. Ici, nous montrons que l'expression des ligands de CXCR2 et les NET prédisent la mortalité des patients atteints du cancer pulmonaire. En utilisant des modèles précliniques, nous avons découvert que les ligands de CXCR2 contrôlent le recrutement et l'activation des neutrophiles au cours de la progression du cancer. Étonnamment, le phénotypage des leucocytes périphériques a révélé que le système immunitaire est soumis à de robustes oscillations circadiennes qui modulent l'expression de CXCR2 et la formation de NET. De plus, nous avons constaté que la propagation des métastases suit un schéma diurne synchronisé avec les fluctuations circadiennes des NET. Enfin, une modélisation mathématique de la pharmacologie des inhibiteurs de CXCR2 a identifié des posologies optimales pour freiner les augmentations diurnes des neutrophiles, ce qui a été confirmé in vivo. Nos résultats suggèrent que la propagation des métastases par les NET peut se produire à des moments précis du cycle jour-nuit et justifient le ciblage temporel des neutrophiles dans le cancer du poumon.

La voie de signalisation Notch joue un rôle clé dans plusieurs processus développementaux. Par conséquent elle est impliquée dans divers maladies et cancers. La signalisation Notch requiert l’interaction entre le récepteur Notch et son ligand Delta exprimé à la surface d’une cellule adjacente. Différents processus régulent la voie Notch, y compris la modulation de l’activité du ligand Delta. Ce dernier doit être ubiquitiné, endocyté, et dans certains types cellulaires, recyclé à la membrane plasmique pour activer Notch. Delta serait modifié lors de ce trafic endosomal, mais la nature de cette modification est inconnue. Le but de mon projet est d’identifier les mécanismes moléculaires régulant l’activité de Delta. Pour cela, nous avons effectué un criblage shARN pan-génomique utilisant un essai de signalisation Notch in vitro. Dans cet essai, nous avons utilisé la lignée stable de souris OP9-DL1 comme cellule émettrice du signal, et les cellules HeLa comme cellules-cibles. L’activité de Notch dans ces cellules a été suivie grâce à un rapporteur luciférase. Nous allons ensuite effectuer des cribles secondaires pour valider les régulateurs potentiels de Delta dans des tissus physiologiquement réceptifs à Notch. En conclusion, ce projet constitue une opportunité unique d’identifier de nouveaux régulateurs de la signalisation Notch, avec une application potentielle dans le domaine clinique afin de développer de nouvelles thérapies pour les cancers impliquant Notch.

Introduction: Récemment, des évidences ont montré que le microbiote intestinal joue un rôle primordial dans l’efficacité des immunothérapies contre les cancers. Cependant, l’implication des bactéries dans le développement des cancers non-intestinaux reste à déterminer. Ce projet vise à étudier le lien entre le microbiote intestinal et le développement du cancer de la prostate (CaP).

Méthodes et Résultats: En utilisant le séquençage du gène de 16S rRNA d'échantillons de selles de 69 patients atteints du CaP, nous avons observé une réduction de la diversité du microbiote intestinal associée avec une augmentation de l'agressivité tumorale. Dans trois modèles murins de CaP différents, nous avons constaté que la croissance tumorale était suffisante pour moduler la composition du microbiote intestinal. Nous avons également étudié la connexion intestin-CaP suite à une supplémentation avec des PUFA chez des patients et des souris, et démontré que cette dernière était capable de moduler la composition du microbiote intestinal. La supplémentation en PUFA ω-3 a principalement ciblé l’abondance des bactéries de la famille des Ruminococcaceae, associée à une réduction de l’agressivité tumorale chez les patients, et à une diminution de la croissance tumorale chez la souris.

Conclusion: Dans l'ensemble, nos résultats démontrent que la composition du microbiote intestinal est modulable par des éléments spécifiques dans la diète, suggérant de nouvelles pistes de prévention et de thérapie en CaP

La symétrie se retrouve partout dans la nature, dans l’art, dans l’architecture. On associe la symétrie et la régularité des formes à un signe de beauté. Au point de vue chimique, on constate que les dimères de produits naturels ou de médicaments possèdent généralement une activité biologique supérieure aux monomères correspondants. Dans cette optique, la conception de dimères de testostérone (1) pourrait mener à des composés ayant des propriétés biologiques uniques et puissantes. La synthèse débute par la transformation efficiente de la testostérone en 7α-butadiènyl-17β-hydroxy-4-androstèn-3-one (2) en 6 étapes chimiques avec 27% de rendement global. Ce composé dimérise facilement à l'aide du catalyseur de Grubbs de 2e génération avec 58% de rendement. L’activité biologique du dimère obtenu, le trans,trans,trans-1,6-bis-(17β-hydroxy-4-androstèn-3-one-7α-yl)hexatriène (3), est évalué sur diverses cellules cancéreuses et sera discuté dans cette communication.

La surexpression des cytokines IL-6 et IL-8 est associée à la progression du cancer de la prostate (CaP) hormono-sensible (HS) vers une forme résistante à la castration (RC) de mauvais pronostic. Dans les lignées HS, l’expression cytoplasmique de la protéine kinase IKKepsilon (IKKε), impliquée dans l’inflammation chronique, est inductible par stimulation au tumor necrosis factor alpha (TNFα). En revanche, dans les cellules RC, IKKε est constitutivement exprimée au cytoplasme et au noyau. De plus, nous avons mis en évidence que l’expression nucléaire d’IKKε corrèle avec la sécrétion d’IL-6/IL8. Afin de décrire la régulation d’IKKε dans le CaP, nous nous sommes intéressés à son partenaire cytoplasmique, la kinase ubiquitaire TBK1. Nous émettons l’hypothèse que TBK1 séquestrerait IKKε au cytoplasme des cellules HS lors de son induction mais, au stade RC, la surexpression d’IKKε permettrait sa translocation nucléaire. Afin de valider notre hypothèse, nous avons généré des constructions lentivirales inductibles permettant l’inhibition de TBK1.Ces outils nous permettront d’étudier les effets de la sous-expression de TBK1 dans les lignées RC, ainsi que dans les lignées HS lorsque l’expression d’IKKε est induite. Les paramètres analysés seront la localisation cellulaire d’IKKε, par immunobuvardage, et la sécrétion d’IL-6/IL-8, par ELISA. Nous serons ainsi en mesure de définir le rôle de TBK1 et d’IKKε dans la progression du CaP et dans l’émergence du statut RC.

OBJECTIF : Les intégrines β1, en interagissant avec la matrice extracellulaire du microenvironnement tumoral, peuvent promouvoir la survie et la progression tumorale. Nous avons  précédemment  démontré  que les intégrines β1 liant le collagène protégent les lymphocytes T effecteurs contre l’apoptose induite par le système Fas/FasL. Dans ce travail, nous avons suggéré que les intégrines liant le collagène peuvent promouvoir la résistance des lymphocytes T malins contre l’apoptose induite par la chimiothérapie anticancéreuse. MÉTHODES : Les lignées leucémiques Jurkat et HSB2 et les lymphoblastes primaires de patients  ont été activées par le collagène ou la fibronectine puis traitées par la doxorubicine. L’apoptose a été évaluée par marquage à l’annexine V et par quantification de la fragmentation de l’ADN. Les niveaux d’expression et d’activation des protéines de la voie mitochondriale ont été déterminés par immunobuvardage. RÉSULTATS : Le collagène via son récepteur l’integrine α2β1 inhibe l’apoptose des cellules T leucémiques induite par la doxorubicine et promouvoit leur croissance clonogénique. La survie via le collagène est liée à l’inhibition de l’apoptose mitochondriale qui est due au blocage de l’activation de JNK et au maintien des niveaux de Mcl-1. L’effet protecteur du collagène est dépendant de la voie MAPK/ERK. CONCLUSION : L’integrine α2β1 liant le collagène pourrait constituer une voie importante de chimiorésistance  des cellules T leucémiques.



L’amplification du gène qui code pour le récepteur 2 du facteur de croissance épidermique humain (HER2) et la surexpression de ce récepteur sont associées à un mauvais pronostic dans le cancer du sein. Depuis l'introduction thérapeutique d’un anticorps dirigé contre HER2 (trastuzumab), l’évaluation fiable du statut de ce récepteur est devenue essentielle. Les lignes directrices du Collège des pathologistes américains recommandent, entre autres, les techniques d’hybridation in situ (ISH) pour l’évaluation de l’amplification du gène HER2 dans les carcinomes mammaires. Étant donné que ces tests sont associés à des coûts très élevés, il est donc très important de développer une méthode plus économique pour la détermination du statut HER2. Dans cette étude, nous avons examiné la concordance du statut d’amplification d’HER2 sur coupe histologique (un tissu par lame, la méthode de référence) et sur matrice tissulaire (64 tissus par lame, la nouvelle méthode) dans une cohorte de 521 tissus de cancer du sein. Nous avons observé une concordance globale de 99,8% entre les résultats obtenus par coupe histologique et par matrice tissulaire. La sensibilité de cette nouvelle méthode était de 98,4% et la spécificité était de 100%. L’utilisation de matrices tissulaires représente une façon économique et fiable d’examiner le statut d’amplification d’HER2, car cette méthode permet d’évaluer le statut HER2 dans plusieurs tumeurs simultanément.

PALB2 est une protéine partenaire essentielle à BRCA2 pour sa fonction dans la réparation des cassures double-brin de l’ADN par recombinaison homologue. Plusieurs mutations ont été identifiées dans le gène PALB2 et corrélées avec une susceptibilité accrue au cancer du sein ou de l'ovaire. Dans ce contexte, nous avons analysé l'effet de la déplétion de domaines fonctionnels de la protéine PALB2, déplétions induites par la présence de mutations identifiées chez des patientes cancéreuses. Les variants de protéines: R170fs, L531fs, Q775x et W1038X, ont été purifiées afin de comparer leurs fonctions biochimiques à celles de la protéine sauvage (PALB2wt). Bien que les variants soient toujours capable de lier l’ADN, leur capacité à stimuler l’invasion de brin réalisée par RAD51 (étape clé de la recombinaison homologue) diffère. R170fs, via son “coiled-coil”, pourrait inhiber l’activité de PALB2wt par interaction directe. Pour les variants L531fs et Q775X, nous proposons qu'ils agissent comme concurrents de PALB2wt et testons cette hypothèse en analysant leur effet sur la stimulation de RAD51 en présence de PALB2wt. Pour W1038X, un effet additif avec PALB2wt quant à la stimulation de l'activité de RAD51 ayant été observé, nous envisageons que ce variant conduise à une recombinaison homologue aberrante. Ces résultats suggèrent que l’expression d'un de ces variants pourrait accroitre l’instabilité génomique, menant à une augmentation de la prolifération cellulaire cancéreuse.

De récents travaux suggèrent un rôle des protéines MCMs dans les mécanismes de réparation de l’ADN en réponse à l’Etoposide. Cet agent chimiothérapeutique, inhibiteur de la topoisomérase II, génère des cassures doubles brins de l’ADN. En réponse à ces dommages deux mécanismes importants sont activés : la Recombinaison Homologue (HR) et la Jonction d’Extrémités Non Homologues (NHEJ). Au cœur de ces mécanismes, les protéines ATM/ATR et DNAPK organisent la réponse cellulaire. Les liens connus entre les protéines ATM/ATR et MCM2 et MCM3 en réponse à plusieurs agents génotoxiques nous ont amené à nous interroger sur l’implication de ces protéines MCM dans les voies de signalisation en réponse aux dommages doubles brins de l’ADN.

Nous avons infecté des cellules d’ostéosarcome U2OS avec des lentivirus exprimant des shARNs dirigés contre les protéines MCM2 et MCM3. Les cellules ont par la suite été traitées avec des concentrations d’Etoposide, des temps de traitement et des temps de repos après traitements différents. Nous avons étudié la phosphorylation des protéines impliquées dans les voies de signalisation des cassures doubles brins ainsi que la sensibilité des cellules en réponse à l’Etoposide. L’activation des protéines des voies de signalisation des dommages doubles brins de l’ADN est altérée lors d’une diminution des protéines MCM2 et MCM3.

Nos résultats suggèrent donc une implication des protéines du complexe MCM dans la réponse cellulaire aux cassures doubles brins de l’ADN.

La traduction d’ARNm en protéines joue un rôle crucial dans la régulation de l’expression génique et constitue le processus cellulaire le plus énergivore. Il n’est donc pas surprenant qu’elle soit étroitement contrôlée dans les cellules “normales”, mais dérégulée dans les cellules cancéreuses. Dans le cadre de cette étude, nous démontrons pour la première fois que le contrôle de la traduction dans les cellules non-cancéreuses du microenvironnement tumoral peut conférer à celles-ci des fonctions pro-métastatiques. Pour ce faire, nous avons utilisé des souris dont la traduction est déficiente due à une mutation dans le site de phosphorylation du facteur eucaryote d’initiation 4E (eIF4E^S209A). Ces souris sont résistantes au développement de métastases pulmonaires issues d’une tumeur mammaire dans un modèle orthotopique. Par opposition, les souris contrôles portant des tumeurs primaires identiques développent des douzaines de métastases pouvant couvrir plus de 50% de la superficie des poumons. Nos résultats indiquent que les neutrophiles sont en grande partie responsables de ce phénotype. Ainsi, les neutrophiles incapables de phosphoryler eIF4E traduisent inefficacement les ARNm encodant des protéines nécessaires à leur survie; ils ne peuvent donc pas s’accumuler dans les poumons et promouvoir la formation de métastases. Nos recherches soulignent l’importance de considérer l’effet sur le microenvironnement tumoral des inhibiteurs de la traduction présentement en essai clinique.

Problématique Lors de la récidive du cancer de la prostate (CaP), des méthodes plus efficaces sont nécessaires pour identifier les métastases et les traiter.

Le ⁶⁴Cu-DOTHA₂-PSMA est composé d’un ligand de l’antigène membranaire prostatique spécifique (PSMA) surexprimé dans le CaP et un chélateur DOTHA₂ du cuivre-64 (⁶⁴Cu) développé par notre groupe offrant une forte stabilité de complexation. Nous proposons d’utiliser ce produit pour cibler le PSMA et ainsi 1) détecter tôt les lésions de CaP en tomographie d’émission de positons (TEP), une modalité d’imagerie non invasive et très sensible et 2) traiter ces lésions par endoradiothérapie par particules β^- et électrons Auger.

Méthodologie La biodistribution du produit est évaluée d'1h à 48h post-injection (p.i.) (n=27 souris balb/c) et permet de calculer la dosimétrie (OLINDA/EXM). L’imagerie TEP bloquée et non bloquée se fait de 0 à 1h et à 4h et 24h p.i. (n=8 souris NRG avec CaP). La survie de ce modèle animal sera comparée entre traitement par ⁶⁴Cu-DOTHA₂-PSMA, ^natCu-DOTHA₂-PSMA ou ¹⁷⁷Lu-DOTA-PSMA (n=30 NRG avec CaP).

Résultats L’imagerie TEP confirme une haute captation tumorale du ⁶⁴Cu-DOTHA₂-PSMA et la spécificité. La survie est plus longue avec le ⁶⁴Cu-DOTHA₂-PSMA que le ^natCu-DOTHA₂-PSMA et non significativement plus longue qu’avec le ¹⁷⁷Lu-DOTA-PSMA. Ce projet conclura quant à l’intérêt de réaliser des études cliniques pour ce nouvel outil prolongeant potentiellement la survie des patients souffrant d’une récidive du CaP.

Les lymphomes T-NK type nasal représentent une forme rare mais agressive de proliférations lymphomateuses malignes.Nous rapportons à travers notre expérience de prise en charge de 7 patients, les caractéristiques cliniques, anatomo-pathologiques et évolutives de cette pathologie. Les dossiers médicaux de 7 patients (4 femmes et 3 hommes) suivis entre 2003 et 2009, ont été étudiés. L’âge moyen de nos patients est de 45,7 ans avec des extrêmes allant de 19 à 74 ans. Le tableau clinique associe des manifestations ORL à type de dysphonie, obstruction nasale, épistaxis, dysphagie, hypoacousie. Dans la majorité des cas la maladie est localisée ( IE, IIE ). L’IPI est inférieur ou égal à 2 dans tous les cas. L’étude anatomo-pathologique confirme la prolifération tumorale faite de grandes cellules positives avec le CD 45 et le CD 3. Le choix thérapeutique est dirigé d’emblée vers l’association Velbé-L Asparaginase-Dexamethasone, chez 4 patients avec une bonne réponse dans deux cas. Les patients traités initialement par CHOP ont rapidement rechuté. Au terme de notre étude, 5 patients sont vivants : 2 en remisssion complète  après une ligne de chimiothérapie et 3 après deuxième et troisième ligne de chimiothérapie. Deux patients sont décédés. La survie moyenne est de 27 mois ( 2 - 69 ). Les lymphomes T-NK type nasal sont une forme rare mais grave de prolifération lymphomateuse. La présentation est le plus souvent localisée. Le protocole CHOP semble inefficace dans cette pathologie.

Contexte : Plusieurs données soutiennent que les gènes Hox jouent un rôle dans la régulation de l’hématopoïèse normale et maligne mais leurs fonctions exactes restent encore mal comprises. Nous avons précédemment montré que les cellules souches hématopoïétiques (CSH) sont particulièrement sensibles au niveau d’expression des gènes HoxA. Nous avons donc posé l’hypothèse suivante : les gènes HoxA jouent un rôle crucial dans l’hématopoïèse définitive. Méthodologie : Pour ce faire, nous avons utilisé un modèle de souris comportant une mutation conditionnelle pour l’ensemble des gènes HoxA. Résultats : Dans notre modèle de souris, la suppression des gènes HoxA se fait efficacement au niveau des cellules hématopoïétiques (91-100%). Un mois suivant la perte des gènes HoxA, le nombre de CSH est réduit dans la moelle osseuse des souris mutantes comparé au contrôle (3-4 fois, p=0,02). De plus, le potentiel des CSH à croitre dans un milieu de culture est diminué par rapport au contrôle (HoxA-/-=42.1 ± 8.48% vs. Contrôles=66 ± 4.9%; p<0.01). Finalement, des essais de transplantations ont démontré qu’a long terme, les CSH HoxA-/- sont sévèrement affectées dans leur capacité à reconstituer une souris receveuse. Conclusion : Dans l’ensemble, ces résultats montrent que les gènes HoxA sont requis pour maintenir l’intégrité des  fonctions des CSH, suggérant que ces gènes jouent un rôle important dans la régulation de l’hématopoïèse adulte.



En 2013, environ 91 400 Canadiennes développeront un cancer, et la majorité sera diagnostiquée du cancer du sein. Un dépistage efficace est donc important pour déceler les lésions précancéreuses et les cancers, et pour réduire l’incidence du cancer et le taux de mortalité. Pourtant, plusieurs disparités dans l’accès au dépistage du cancer du sein et du col de l’utérus ont été documentées chez diverses populations. Le programme de recherche H-CARDD a démontré qu’en Ontario, la proportion de femmes avec une déficience intellectuelle (DI) n’ayant pas reçu de dépistage pour le cancer du col de l’utérus est presque le double de celle des femmes sans DI et 1,5 fois plus élevé pour les mammographies. Une recension systématique est utilisée pour contextualiser les disparités retrouvées entre les femmes avec et sans DI vivant en Ontario. Nous explorons l’utilisation des soins prodigués aux femmes qui ont reçu un dépistage en comparaison à celles qui n’ont pas reçu de dépistage. Nous commentons sur la force de l’association entre les variables clés identifiées dans l’utilisation de soins de santé et les disparités dans le dépistage du cancer du sein et du col de l’utérus. Une meilleure compréhension des facteurs influençant l’accès au dépistage du cancer du sein et du col de l’utérus soutiendra l’amélioration des programmes de santé publique et la formation des professionnels de la santé à répondre aux besoins de groupes vulnérables.

La leucémie myeloïde aiguë (LMA) est une maladie mortelle spécialement chez les patients pédiatriques présentant la translocation chromosomique MLL-AF9. Encore aujourd'hui, l'étiologie du développement de la LMA demeure imprécise, expliquant en partie, pourquoi le traitement des patients pédiatriques reste inefficace. Récemment, l'analyse du transcriptome de nombreux patients leucémiques a révélé une corrélation entre la translocation MLL-AF9 et une répression accrue du gène HOXB4 chez les patients pédiatriques atteints de LMA.

Après avoir surexprimé HOXB4 par infection lentivirale dans la lignée cellulaire leucémique THP-1 (possédant la translocation MLL-AF9), nous avons observé une diminution de la prolifération cellulaire. Pour comprendre les causes de ce phénotype, nous avons analysé le transcriptome par séquençage haut débit qui a notamment révélé un enrichissement en gènes associés à la différenciation cellulaire tels que EGR1/2, S100A8/9 et FGL2. De plus, nos données de cytométrie en flux supportent la différenciation de notre lignée cellulaire de monocytes en macrophages.

Par l'éclaircissement du contexte dans le lequel HOXB4 interagit avec le programme oncogénique de MLL-AF9, cette étude ouvre la voie à l'identification de nouveaux gènes et voies de signalisation impliqués dans le développment de la LMA. Ces nouveaux gènes pourront servir de cibles thérapeutiques dans l'élaboration de thérapies personnalisées.



Le métabolisme des sphingolipides est associé à la transformation oncogénique et un rôle de la low density lipoprotein receptor-related protein (LRP1) a été démontré dans la signalisation pro-angiogénique de la sphingosine-1-phosphate (S1P). Bien que la S1P joue un rôle clé dans la perméabilité de la barrière hémoencéphalique (BHE), sa signalisation interdépendante avec LRP1 dans les cellules endothéliales cérébrales (CEC) demeure peu connue. Nous émettons l’hypothèse que des mécanismes adaptatifs altérant l’axe LRP1/S1P soient requis dans les CEC microvasculaires humaines (HBMEC) immortalisées par le virus SV40, un modèle imitant le phénotype de l’endothélium tumoral cérébral. Des lignées de HBMEC réprimant LRP1 de façon transitoire ou stable ont été générées et l’augmentation de l’expression génique de la protéine de liaison activatrice/CCAAT β (C/EBPβ), un facteur transcriptionnel régulant l’expression des récepteurs de la S1P, a été observée dans les cellules stables. Les processus de migration sont altérés et les récepteurs de la S1P modulés par une répression stable de LRP1 in vivo dans des CEC isolées de souris Lrp1(CE)^-/- et in vitro dans les HBMEC LRP1^-/-. Enfin, le récepteur S1P₃ est nécessaire à la migration des HBMEC. Collectivement, nos résultats mettent en évidence un phénotype adaptatif liant LRP1 à la signalisation de la S1P, rendant possible le ciblage de l’axe de signalisation LRP1/S1P à la BHE pour de futures stratégies thérapeutiques.

Le facteur de fragmentation de l’ADN de 40 kDa (DFF40) est l’enzyme majoritairement responsable de la fragmentation internucléosomale de l’ADN lors de l’apoptose. Son expression et sa localisation cellulaire sont altérées au niveau de divers cancers, notamment chez certains neuroblastomes et leucémies.

Notre hypothèse est que des modifications post-traductionnelle (MPT) du DFF40  sont impliquées dans la régulation de son activité et de sa localisation. Le DFF40 possède des sites potentiels de compétition entre O-glycosylation et phosphorylation. Les lymphocytes T Jurkat ont été séparés en fraction cytoplasmique, membranaire, nucléaire et liée au cytosquelette. Les protéines O-glycosylées ont été purifiées à l’aide de la lectine succinylées de germe de blé (sWGA) et les protéines phosphorylées ont été purifiées par chromatographie d’affinité. Nos résultats démontrent que le DFF40 est O-glycosylé, de même que phosphorylé. L’O-glycosylation favoriserait la localisation membranaire de la protéine et la phosphorylation pourrait jouer un rôle dans la régulation de son oligomérisation. Des résultats préliminaires suggèrent que le DFF40 membranaire serait localisé au niveau de la mitochondrie. 

Ce projet permettra de mieux comprendre la régulation de la fragmentation de l’ADN lors de l’apoptose,  un processus qui, lorsqu' altéré, peut mener à une résistance tumorale face à la chimiothérapie.

Problématique: L’activation du système rénine/angiotensine/aldostérone (RAS) est lié au développement de la dysfonction endothéliale, associé à une défaillance de la capacité de néovascularisation en réponse à l'ischémie. Toutefois, le rôle spécifique de la rénine durant la réponse physiologique des tissus à l’ischémie est inconnu. L’aliskiren est le seul inhibiteur direct de la rénine utilisé cliniquement comme antihypertenseur. L’objectif de l’étude est d’investiguer l’effet de l’aliskiren sur la néovascularisation en réponse à l’ischémie.

Méthodes et résultats : In vivo, nous utilisons un modèle de souris ischémique de la patte (C57BL/6) induit chirurgicalement. Nos résultats obtenu au laser doppler montrent une augmentation significative (30% d'augmentaion vs placebo, p<0.05) du débit sanguin chez les souris traité pendant 3 semaines à l’aliskiren (10mg/kg/j). Les souris traités à l'aliskiren montrent également une plus grande densité capillaire, ainsi qu’une réduction du stress oxydant au niveau du muscle ischémique. De façon intéressante, l’aliskiren augmente aussi le nombre, la mobilisation et l’activité fonctionnelle des cellules angiogéniques de la moelle osseuse, associés à l’expression  des marqueurs pro-angiogéniques (VEGF, eNOS) dans le muscle ischémique et dans le plasma.

Conclusions: L’inhibition de la rénine par l’aliskiren pourrait constituer une nouvelle stratégie thérapeutique pour améliorer la néovascularisation chez les patients atteints de pathologies cardiovasculaires ischémiques.