Implication de l’ubiquitination de SMARCAL1 par les E3 ubiquitine ligases PRP19 et RFWD3 dans la réponse au stress réplicatif

Le stress réplicatif est une source majeure de stress génotoxique pouvant causer des lésions de l’ADN durant la réplication. Afin d’éviter le dérèglement de leur programme génétique, les cellules possèdent des mécanismes complexes de réponse aux dommages à l’ADN. Le blocage des fourches de réplication au niveau de lésions génère de l’ADNsb simultanément recouvert par la protéine de réplication A (RPA). La plateforme RPA-ADNsb est essentielle à la signalisation, au recrutement et à l’activation de protéines cruciales pour la protection du génome. Nous avons montré que les E3 ubiquitines ligases PRP19 et RFWD3 ubiquitinent RPA pour favoriser la réparation de l’ADN. Des analyses protéomiques ont indiqués que PRP19 interagit avec l’hélicase SMARCAL1 sur la plateforme RPA en réponse au stress réplicatif. SMARCAL1 est une enzyme cruciale pour le redémarrage des fourches bloquées et possède un domaine d’interaction avec RPA. Nous avons montré par des essais d’ubiquitination in vivo que SMARCAL1 est ubiquitiné par PRP19 et RFWD3. La déplétion de PRP19 et RFWD3 par ARNi et l’analyse par immunofluorescence suggèrent une sur-accumulation de foyers SMARCAL1 aux sites de dommages en réponse au stress génotoxique. Une telle sur-accumulation de SMARCAL1 est connue comme étant délétère pour la stabilité du génome. Nos résultats suggèrent que l’ubiquitination de SMARCAL1 par PRP19 et RFWD3 pourrait limiter son activité aux sites endommagés et favoriser la réparation des fourches réplicatives.