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Auteur et co-auteurs
Carla-Marie Jurkovic
UdeS - Université de Sherbrooke
François-Michel Boisvert, Dominique Lévesque
UdeS - Université de Sherbrooke, Pavillon de Recherche Appliqué sur le Cancer - Université de Sherbrooke
5a. Résumé

La connaissance des unités fonctionnelles des mécanismes de réplication et réparation de l'ADN est primordiale pour comprendre ces processus biologiques complexes. Le but est d’observer comment les complexes de réparation sont recrutés sur les sites de lésions de l'ADN en étudiant la dynamique d'assemblage de complexes lors de stress causé pendant la réplication. Ces complexes sont analysés grâce à leurs interactions plus ou moins directe avec différentes protéines d'intérêt ayant un rôle connu dans la réparation/réplication de l'ADN telles que RPA1/RPA2/RPA3 et d'autres. Grâce au système BioID2 couplée à la spectrométrie de masse, nous pouvons identifier les protéines qui se retrouvent à proximité de la fourche de réplication. Nous avons cloné et généré des lignées stables 293FT inductibles pour ces protéines couplées à BioID2 pour un ciblage sélectif et une localisation améliorée de la protéine de fusion afin de détecter les associations protéine-protéine et les protéines proches par biotinylation. Suite à la synthèse en condition de croissance normale et suite à des stress réplicatifs induits à l’hydroxyurée, une purification des complexes et une analyse de l’interactome on été faites. Ces nouvelles stratégies protéomiques quantitatives permettent une identification de la dynamique spatio-temporelle de l’assemblage/désassemblage de protéines sur les sites de rupture d’ADN. Cela pour apporter un regard neuf et de mieux comprendre certains dérèglements menant au cancer.


Commentaires

Regine Potier
Travail sérieux, intéressant, et pertinent. Présentation très belle et claire avec nombreux schémas à l’appui. Un avenir prometteur ! Bravo à vous !