Enrichissement et caractérisation des exosomes de la cornée humaine

La cornée, de par sa localisation anatomique superficielle, est très vulnérable aux divers traumatismes pouvant l’affecter. Le processus de cicatrisation activé à la suite d’une lésion nécessite une communication étroite entre les types cellulaires constituant les trois couches de la cornée (épithélium, stroma et endothélium). Cette communication est notamment assurée par les exosomes, de petites microvésicules relarguées par les cellules, qui transportent différents cargos, tels que des protéines, des lipides et des acides nucléiques. Les exosomes ont été identifiés dans plusieurs systèmes mais il existe très peu d’informations quant à leur rôle dans la cornée. L’objectif de cette étude consistait à isoler et caractériser les exosomes des trois types cellulaires de la cornée et d’évaluer leur contribution dans plusieurs processus biologiques. Ceux-ci ont été enrichis par ultracentrifugation différentielle, puis caractérisés par cytométrie à haute sensibilité, immunobuvardage Western, Dynamic Light Scattering et microscopie électronique à transmission. L’ultracentrifugation différentielle s’est avérée être une méthode efficace pour l’enrichissement des exosomes des trois types cellulaires de la cornée. Des microvésicules d’une taille inférieure à 100nm et exprimant plusieurs marqueurs spécifiques aux exosomes ont été observées. Une fois leur caractérisation complétée, nous pourrons chercher à mieux comprendre leur participation à la guérison des plaies cornéennes.